熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)的各種光源,是其結(jié)構(gòu)和功能的重要組成部分,但與CCD、鏡頭以及分析軟件相比,往往卻沒有得到應(yīng)有的重視。我們經(jīng)常遇到這樣的用戶,他們知道系統(tǒng)光源出現(xiàn)故障或整個(gè)系統(tǒng)報(bào)廢的時(shí)候都不知道凝膠成像透射紫外中有305nm與365nm兩種紫外燈管,或者搞不清他們之間有何區(qū)別。這其中固然有銷售商售后的不到位,但也反映出我們對
熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)光源的不重視和缺乏足夠的了解,為此我們撰以此文,以期幫助用戶厘清他們的區(qū)別和各自的作用,讓您能夠更好的選擇購買、使用以及保養(yǎng)維護(hù)凝膠成像系統(tǒng)。
根據(jù)應(yīng)用的不同,往往不同型號凝膠成像產(chǎn)品配有差異性的光源,大致類型可分為白光光源、紫外光源和高強(qiáng)度三色LED燈,其中白光和紫外光源又分別有透射(transilluminate)和反射(Epi)之分。
下面我們對
熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)的各種光源及其用途做簡要介紹,首先是雙側(cè)反射白光光源,也是我們使用zui多的光源,通常作為系統(tǒng)照明光源使用,即放置或調(diào)整DNA膠或蛋白膠位置,或在對鏡頭調(diào)整聚焦時(shí)使用,當(dāng)然在對非透明材質(zhì)的蛋白膠或其他成像物質(zhì)進(jìn)行成像時(shí)也需開啟反射白光。
其次透射白光,即通常所說白光板,主要用于蛋白質(zhì)膠拍攝時(shí)使用,因?yàn)榘坠獍逦挥谕干渥贤鉄粝渖戏剑詾椴挥绊懲干渥贤夤庠吹氖褂?,同時(shí)也更節(jié)約室內(nèi)空間,白光板一般可以折疊豎立在箱體后部。
透射紫外光源,即紫外透射燈箱,主要用于DNA膠拍攝,由于DNA常用的熒光染料是EB(即Ethidium bromide,溴化乙錠),而用標(biāo)準(zhǔn)302nm 紫外光透射儀激發(fā)并放射出橙紅色信號,可用帶CCD成像頭的
熒光化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)拍攝到,所以透射紫外的波長通常是305nm段。
目前,許多廠家設(shè)計(jì)了雙波長的透射紫外燈管(302nm、365nm),其365nm光源主要適用于制備觀察以及切割條帶,減少對DNA的破壞,并減小對人的傷害。
紫外反射燈源,一般為選配件,主要原因是其使用并不廣泛,只是在非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像才需要使用。往往比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠 與聚丙烯酰胺凝膠,透射光源*可以滿足,所以大部分廠家都只將紫外反射光源作為選配,只是在儀器上預(yù)留了位置與接口。